试管婴儿精子取之于精子无偿帮助者身上。根据精液分析结果,如果精子无偿帮助者的精子数量足够多,精子质量也达到要求,工作人员便可以收取精子无偿帮助者的精子。通常向一名无偿帮助者收集精子是在50-150毫升之间。收取精子后会把取出的精子进行检测,如果精子检查结果满足相应的要求,就可以使用这些精子进行试管婴儿。收取的精子有时可以在体外培养数小时后用于受精,有时可以经过几个星期的体外培养,在受精时数量和质量上均达到一定的数量要求。
试管婴儿的精子取之于男性朋友、丈夫,或是付费的精子自己。试管婴儿技术普及后,让不孕、先天性问题或是因为宗教原因等,拒绝采用传统方式生育方式的夫妻取得了父母梦。

以男性朋友、丈夫为精子提供者是得到最多考虑的方案,有利于夫妻双方接受性和信心获得的提升。从男性朋友或丈夫获取的精子有形象的意义,及更大的道德和责任感负担,但有隐瞒和不透明的风险。
付费的精子自己是一种可行的办法,他们会根据患者的家族史和健康足迹进行精液筛选,然后让病人对精液样本进行选择,提高形象度和成功率。但在部分地区,精子自己还处于非法状态,使患者使用精子自己获得多大程度上也受制于法律和社会规范。